3M测试片操纵
1.固体
以无菌操纵将25 g样品加入到225 mL的稀释液(磷酸盐缓冲液或0.1%蛋白胨水)中,8000 r/min均质2 min (或放入无菌均质袋中,用均质器敲打2min),制成1 :10样品匀液。
2.液体
取25 mL样品原液,放入装有225 mL,稀释液的无菌玻璃瓶中,以30 cm升沉, 7s内振摇25次,制成1 : 10样品匀液。
将上述匀液做10倍系列梯度浓缩,依据样品的传染水平,抉择适合的2个-3个继续浓缩度,每一个浓缩度接种2张考试片。
将PYM检验考试片放在平坦的实验台上,揭开下层膜,用移液器将1 ml样液加到考试片的中 心,悄然遮盖下层膜,用压板安稳压下,使其匀称遮盖在考试片的圆形哺育面积上,拿起压板,静置至多1 min,使哺育基凝集。
将考试片的透明面朝上放置于哺育箱内,重叠不克不及跨越20片,在25℃-28 ℃下哺育3d-5d。